无水柠檬酸的生产方法共可分为3种：水果提取法，化学合成法，生物发酵法。

1.水果提取法：柠檬酸可以从柠檬、橙、橘子、苹果等柠檬酸含量较高的水果中提取。但此法成本较高，不利于投入工业化生产。

2.化学合成法：原料有丙酮、二氯丙酮或乙烯酮。由于化学合成法工艺复杂，成本高，安全性较低，很少使用。

3.生物发酵法：包含表面发酵法、固体表面发酵法、深层发酵法、石油烃发酵法四种。而其中深层发酵周期短，产率高，节省劳动力，占地面积小，便于实现仪表控制和连续化。所以目前多以糖蜜（甜菜糖蜜、甘蔗糖蜜等），淀粉质原料（木薯、玉米等）为原料，采用黑曲霉为发酵菌种，以深层发酵的方法生产柠檬酸，产量约占80%。

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